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1.     2、疫苗表達(dá)產(chǎn)物的優(yōu)化與確認(rèn)

    Spike蛋白（S蛋白）承擔(dān)病毒與宿主細(xì)胞膜受體ACE2結(jié)合及膜融合功能，是中和抗體的重要作用位點以及疫苗設(shè)計的關(guān)鍵靶點。目前針對新冠病毒S蛋白的疫苗設(shè)計中，有一部分疫苗只針對RBD（受體結(jié)合結(jié)構(gòu)域）；但是RBD畢竟只是S蛋白很小一部分，需要分析重組RBD蛋白（疫苗主要成分）與ACE2結(jié)合的動力學(xué)常數(shù)，并確認(rèn)該常數(shù)與全長RBD-Spike蛋白的動力學(xué)常數(shù)接近。2020年7月，四川大學(xué)華西醫(yī)院生物治療國家重點實驗室和澳門科技大學(xué)醫(yī)學(xué)院教授共同在Nature在線發(fā)表題為“A vaccine targeting the RBD of the S protein of SARS-CoV-2 induces protective immunity”的研究論文，通過SPR技術(shù)驗證了重組RBD蛋白與ACE2的親和性，結(jié)果表明RBD以高親和力與ACE2結(jié)合，這很好地反映出了重組RBD蛋白有天然構(gòu)象。²

    在基于整個S蛋白的疫苗中，為了保持S蛋白的融合前狀態(tài)，一般會將弗林酶識別位點以及CH結(jié)構(gòu)域位點突變掉。在這種情況下，可以使用SPR技術(shù)來確認(rèn)人體對疫苗表達(dá)產(chǎn)物產(chǎn)生的抗體和天然的S蛋白免疫產(chǎn)生的是否具有一樣的生物活性，從而達(dá)到疫苗的免疫效果。Novavax公司的NVX-CoV2373是一種新冠納米顆粒疫苗，由全長SARS-CoV-2棘突糖蛋白三聚體和Matrix-M1佐劑組成。其I期臨床結(jié)果已經(jīng)公布³，是目前在研疫苗中在體內(nèi)產(chǎn)生的抗體滴度最高的。該疫苗的表達(dá)產(chǎn)物保持了與受體ACE2以及一種RBD中和抗體的親和力。⁴

1. 3、抗原活性濃度測定

    抗原活性濃度測定是疫苗質(zhì)控的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。利用SPR技術(shù)可以對流感疫苗中的抗原活性濃度進(jìn)行準(zhǔn)確定量測定。與經(jīng)典的單向免疫擴(kuò)散法（SPID）相比，SPR技術(shù)具有更高的靈敏度和準(zhǔn)確性。LOD 和 LOQ 較 SPID 法相比均降低了一個數(shù)量級，準(zhǔn)確度高達(dá) 95%-105%；更能保證產(chǎn)品的批間一致性。

1. 4、雜質(zhì)蛋白鑒定

    宿主蛋白殘留（HCP）可能對疫苗的安全性和有效性產(chǎn)生影響。因此，HCP含量檢測對于控制疫苗的質(zhì)量和安全尤為重要。使用SPR技術(shù)進(jìn)行濃度測定，準(zhǔn)確度高達(dá)96%-108%；遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于標(biāo)準(zhǔn)的ELISA方法。

目前全球新冠疫情蔓延的形勢仍然非常嚴(yán)峻并且不斷出現(xiàn)病毒變異，各國對疫苗需求極為迫切，SPR技術(shù)越來越受到各大疫苗研究機(jī)構(gòu)和生產(chǎn)廠家的重視。北京英柏生物科技有限公司作為國內(nèi)唯一擁有全部SPR技術(shù)自主知識產(chǎn)權(quán)的高新技術(shù)公司愿為大家提供商品化和定制化解決方案，助力疫苗研發(fā)和生產(chǎn)。

1 Ju, B. et al. Human neutralizing antibodies elicited by SARS-CoV-2 infection. Nature 584, 115-119, doi:10.1038/s41586-020-2380-z (2020).

2 Yang, J. et al. A vaccine targeting the RBD of the S protein of SARS-CoV-2 induces protective immunity. Nature 586, 572-577, doi:10.1038/s41586-020-2599-8 (2020).

3 Keech, C. et al. Phase 1-2 Trial of a SARS-CoV-2 Recombinant Spike Protein Nanoparticle Vaccine. N Engl J Med 383, 2320-2332, doi:10.1056/NEJMoa2026920 (2020).

4 Tian J-H, P. N., Haupt R, et al. SARS-CoV-2 spike glycoprotein vaccine candidate NVX-CoV2373 elicits immunogenicity in baboons and protection in mice.doi:https://doi.org/10.1101/2020.06.29.178509 (2020).